今天跟大家分享一下關(guān)于纖維素酶菌種選育的方法，下面就讓我們一起來(lái)了解一下吧。
菌種選育是纖維素酶生產(chǎn)的基礎(chǔ)性工作，國(guó)內(nèi)外許多專(zhuān)家進(jìn)行了大量研究，為了生產(chǎn)高質(zhì)量的纖維素酶產(chǎn)品，王家林等(1996)在吸收國(guó)內(nèi)外經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，先后引進(jìn)了綠色木霉木10、綠色木霉Sn-91014、康氏木霉NT-15、黑曲霉XX-15A。
在此基礎(chǔ)上，采用了紫外線、特定電磁波輻射、線性加速器，亞硝基胍等物理、化學(xué)的誘變方法，獲得了高產(chǎn)菌株NT15-H、NT15-H1、XT-15H、XT-15H1。
其中木霉NT-15H固體培養(yǎng)活力經(jīng)輕工部食品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)中心南京站檢測(cè)表明，濾紙活力為3670u/g, C1-酶活力24460u/g，Cx-酶活力1800u/g，已達(dá)到*水平。
此菌種在工廠化生產(chǎn)中性能穩(wěn)定。張苓花等(1998)采用康氏木霉W-925，J-931，經(jīng)過(guò)濃度為2%硫酸二乙酯和紫外線(15W、30cm、2min)復(fù)合誘變后，得到了產(chǎn)酶活性高的Wu-932菌種，該菌種CMC糖化力達(dá)到2975，濾紙?zhí)敲富钚詾?31，比出發(fā)菌W-925分別提高了100%和81%。
化工部飼料添加劑技術(shù)服務(wù)中心王成書(shū)等(1997)采用該中心的里氏木霉A3*行紫外線和亞硝基胍復(fù)合誘變后，將處理過(guò)的孢子接種于纖維雙層平板上，30℃培養(yǎng)5-8天，15℃放置7-10天，挑選透明圈直徑和菌落直徑比較大的單菌落進(jìn)行三角瓶固態(tài)發(fā)酵再篩選，得到了產(chǎn)纖維素酶活力很高的里氏木霉91-3菌株。
纖維素酶菌種易退化，退化后其產(chǎn)酶力明顯降低，其原因可能有三個(gè)方面:
①經(jīng)誘變篩選的菌種發(fā)生回復(fù)突變。
②自然負(fù)突變。
③菌種長(zhǎng)時(shí)間低溫斜面保藏，會(huì)在分生孢子上長(zhǎng)出次生菌絲，而次生菌絲所形成的分生孢子生命力弱，這可能是菌種退化的主要原因。
為了避免纖維素酶菌種退化，張苓花等(1998)報(bào)道，采用砂土管保藏菌種。即將過(guò)篩洗凈的砂子與土以3:2比例混合分裝在試管內(nèi)，用1kg/cm2壓力滅菌30分鐘共三次，將欲保存的斜面菌種制備成1000ml孢子懸浮液，每個(gè)砂土管注入0.5ml，搖勻，放入盛有無(wú)水CaCl2真空干燥器內(nèi)保存。
經(jīng)測(cè)定，在所測(cè)的121天內(nèi)，酶的活性基本不變;酶活性下降50%的時(shí)間，由常規(guī)方法的60天延長(zhǎng)至160天，明顯地減緩了菌種退化速度。
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